產品與服務
產品概述
本產品是一種簡單、快速、高效的超純化慢病毒濃縮液，濃縮后病毒滴度可提高10-100倍，并能有效去除病毒上清液中90%以上的血清蛋白、細胞碎片、基因組DNA等，效果顯著優于PEG濃縮。
產品組成
組分名稱 | 貨號 | 規格 |
超純化慢病毒濃縮液（5X） | FZ022-03 | 3 mL |
超純化慢病毒濃縮液（5X） | FZ022-15 | 15 mL |
超純化慢病毒濃縮液（5X） | FZ022-50 | 50 mL |
產品優勢
1. 使用便捷。無需長時間低溫孵育，僅用普通冷凍離心機10000 ×g離心2-4 h即可。
2. 病毒濃縮效率高。使用本產品進行濃縮，病毒回收率最高可達約90%，病毒損失量極少。
3. 病毒純度高，純化效果好。相較于傳統的PEG濃縮，本產品可有效去除病毒上清液中90%以上的雜蛋白，有效降低細胞毒性。
4. 回收的病毒活性滴度高。本產品在濃縮過程中能保持病毒生物活性，能在同等病毒添加量下，達到更好的染毒效果。
儲存及運輸條件
冰袋運輸。試劑置于4 ℃保存，有效期一年。
使用方法
1. 取收集得到的含病毒的上清液，使用0.45 μm針式濾器(PES)過濾以充分過濾細胞碎片。
注：須用聚醚砜膜(PES)的針式濾器過濾，其它材質如硝酸纖維(NC)膜可能對病毒產生吸附。
2. 取過濾后的病毒原液40 mL，加入10 mL 4 ℃預冷的超純化慢病毒濃縮液（病毒原液的1/4體積），混勻，將離心管轉移至預冷的離心機中，4 ℃，10000 xg，離心2-4 h，此時離心管底通常可見少量白色沉淀。
注1: 超純化慢病毒濃縮液體積應為病毒原液的1/4。
注2：為獲得更高病毒回收率，優先推薦離心4 h。
注3：離心機升降速推薦為升9降3，以免破壞離心后的沉淀。
3. 小心吸棄上清，靜置1~2 min，吸液去除所有的殘余液體，同時注意不要破壞已沉淀的病毒顆粒。向離心管內加入1/10~1/100體積冷的病毒重懸液（無菌PBS緩沖液或DMEM培養液），在4 ℃條件下使用移液器小心吹打20~30次重懸病毒沉淀。根據后續需要，適當分裝后，-80 oC凍存備用。
注1：可通過降低病毒重懸液的體積來獲得滴度更高的病毒液。
注2：有時沉淀不可見，需要在沉淀可能形成的區域用移液器小心吹打。
注3：避免劇烈吹打，產生氣泡可能導致病毒失活。
注4：全程操作請保持低溫，以防慢病毒滴度下降。
注意事項
1. 為避免病毒失活，濃縮前的病毒上清液或濃縮后的病毒都應盡量避免反復凍融。建議分裝后標記（病毒名稱，年-月-日），置于-80 ℃冰箱保存。
2. 本產品僅限于專業人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品。
數據展示
1.將某過表達慢病毒（2E6 TU/mL）使用不同方式濃縮，其中超純化濃縮離心時間設置為4h，PEG濃縮液低溫孵育時間設計為6h，離心后使用PBS重懸沉淀，超濾條件為100KDa離心管，4000xg 4℃離心，體積濃縮60倍，得到的濃縮產物感染HEK293T細胞，染毒44h結果對比如下：
2.某過表達慢病毒（轉移質粒大小約10 kb）使用E-poly? Fast-Lv包裝試劑盒正向包毒48小時后收毒，測定病毒上清液出毒滴度為2E6 TU/mL。將樣本1（ 20mL 病毒原液）、樣本2 （ 10mL 病毒原液）分別使用超純化慢病毒試劑盒進行40X濃縮，濃縮時間設置2h、4h兩組對比，濃縮產物感染HEK293T細胞，染毒69h結果對比如下：
使用BCA蛋白濃度測定試劑盒分別對上述四管濃縮產物進行蛋白殘留檢測，檢測結果如下：
